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明星產(chǎn)品

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All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase)
產(chǎn)品貨號:RR0701
產(chǎn)品品牌:AboRo
產(chǎn)品分類:分子生物學(xué)試劑
產(chǎn)品規(guī)格:100T
產(chǎn)品價格:799

產(chǎn)品介紹

KEIris RT mix with dsDNase(All-in-One)是將 RNA 合成cDNA 的一個操作更為簡便的系統(tǒng),含有第一鏈 cDNA 合成所需的全部試劑,僅需加入 RNA 模板和水即可進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),操作非常方便。使用該逆轉(zhuǎn)錄預(yù)混液 15 分鐘內(nèi)最長可獲得12 kb 大小的cDNA。合成的cDNA 推薦用于qPCR 反應(yīng)。該預(yù)混液采用特制的高效 dsDNase,該酶具有熱敏感性, 可在高溫條件下快速不可逆地失活,因此僅需一次加樣,即可同管進(jìn)行去除基因組 DNA 污染與逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),與使用DNase I 去除基因組 DNA 污染相比,無需額外加入 EDTA 進(jìn)行失活,不僅減少了對 RNA 模板的損傷、降低 RNase 污染風(fēng)險,而且節(jié)省實(shí)驗(yàn)時間。

注意事項(xiàng)

1. RNA 模板的純度和完整性是影響逆轉(zhuǎn)錄效果的重要因素, 如模板中含有蛋白、EDTA、酚等雜質(zhì)會使 RNA 降解。

2. 若后續(xù)實(shí)驗(yàn)為 qPCR,逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加量應(yīng)不超過 PCR 體系終體積的 1/10,如 20 μL PCR 反應(yīng)體系,逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加量應(yīng)不超過 2 μL。

3. 預(yù)混液中已經(jīng)包含 Oligo(dT)20VN 和隨機(jī)引物,不僅適用于包含 Poly(A) 結(jié)構(gòu)的真核生物 mRNA,也適用于不含Poly(A)結(jié)構(gòu)的原核生物 RNA、真核生物 rRNA tRNA 等模板,但不適用于 miRNA 等小 RNA 模板。


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